MycoLightTM比率细菌膜电位试剂盒*红/绿荧光*产品操作简单快捷，能帮助科研人员更好地进行科学实验。
艾美捷MycoLightTM 比例细菌膜电位试剂盒程序如下：
1.在任何合适的培养基中培养细菌。健康细菌zui好的结果来自于对数期的培养。PBS（成分C）或者在相同的无菌缓冲液中，将细菌培养物稀释到每毫升约106个细胞。细菌可以在不清洗的情况下直接从培养基中稀释。每次试验准备足够的悬浮液并提供500 mL。
2.将等分的500μl每次染色试验都将细菌悬浮液放入流式细胞仪管中。为去J化对照品和未染色对照品准备两个附加试管。
3.向J化对照样品添加10μl 500μM CCCP（成分B）并混合。
4.添加5μl霉菌染色剂 将绿色（100X）（成分A）注入每个流式细胞仪试管并混合（不要将染色剂添加到未染色的对照样品中）。在室温下培养样品30分钟。5分钟后可分析染色样品，但信号强度持续增加，直至约30分钟。
5.染色细菌可配备488 nm分析激光流细胞仪。荧光收集在绿色（荧光滤光片）和红色（德克萨斯红色滤光片）通道中。通过对数信号放大收集前散射、侧散射和荧光。
6.仪器调整对于检测相对较小的颗粒（如细菌）尤为重要。在正向和侧向散射通道中使用未染色的对照样品定位细菌种群。采集触发器的参数采用侧散射。
7.如上述调整流细胞仪，应使用去J对照样品。利用正散射和侧散射选择细菌，调整荧光光电倍增管电压，使绿色和红色MFI值大致相等。不要设置补偿。
8.红色和绿色荧光强度的相对数量会随细胞的大小和聚集而变化，而红色和绿色荧光强度的比率可以作为膜电位无关的指示器。数据还可以通过使用前向散射和侧向散射来处理细菌，并使用红色和绿色荧光点图来分析选定的种群MFI值是线性值，而不是通道。
9.在比率方图上，在感兴趣的峰值周围设置标记，并记录平均比率。对于红绿荧光点，在感兴趣的群体周围设置区域，记录每个群体的红绿平均荧光强度（MFI）值。为了评估数据，红色的整体MFI除绿色整体外MFI。
10.在流式细胞仪中，细菌仅根据其大小和染色能力进行鉴定。zui通过荧光显微镜检查每个样品，确认检测到的颗粒确实是细菌。