过氧化物酶(HRP)它是一种能催化过氧化氢氧化多种基质的血红蛋白，如抗血酸盐、亚铁氰化物、细胞色素等c和许多染料的无色形式。HRP的分子量为40 kDa，最适pH值为7.0。稳定性：HPOFF在2-8°C下可稳定9-12个月。HPOD在2-8°C下可稳定2至3年。
单位定义：一个Worthington单位在25°C、pH 7.0每分钟分解氨基安替比林和苯酚1μmole H 2 O 2。
技术说明：RZ (Reinheitzahl)是吸光率比，A 403 /A 已被用作纯度指示的275。然而，Shannon et al., JBC, 241 , 266 (1966)同工酶的比酶的比例2.50到4.19之间变化。这一点与缓冲液和pH该值的影响似乎质疑了该比率作为纯度标准的准确性。
过氧化物酶活性的测定有许多不同的方法。以下列出了艾美捷Worthington一些确定的近似转换。
?1个Worthington单位= 4.6个Worthington以前使用的邻联苯胺单位
?1个Worthington单位= 0.62个ABTS单位(每分钟氧化的微摩尔染料，pH 6.0，25°C，1.7 mM染料）
?1个Worthington单位= 2个ABST单位（μmole每分钟氧化染料，pH 5.0，25°C，8.7 mM染料）
?1 Worthington单位= 0.5愈创木酚单位(每分钟氧化愈创木酚)μmole，pH 7.0，25°C）
?1 Worthington单位= 0.5连苯三酚到purpogallin单位（mg产品每20秒，pH 6.0，20°C）
?1 Worthington单位= 5连苯三酚到purpogallin单位（在pH 6.0，30°C微摩尔产品每分钟)
艾美捷
方法：传统上，过氧化物酶活性以苯三酚的氧化速率为单位，即Willstalter和Stoll在1917最近的研究表明，这种方法有些不足。（Maehly和Chance 1954。）各种氢供体，包括可能致癌的化合物，如邻联茴香胺，已用于过氧化物酶测定系统。采用4-氨基安替比林已被用作氢供体的改进测量方法（Trinder 1966）。通过测量过氧化氢分解引起的反应速率510 nm确定吸光度的增加。在指定条件下，在25°C和pH 7.0在这种情况下，一个单位会导致每分钟的分解1微摩尔过氧化氢。
试剂：
0.2 M磷酸钾缓冲液pH 7.0
0.0017 M过氧化氢。用试剂级水1 ml 30%过氧化氢（Merck Superoxol或等效物)稀释至100 ml。用0.2 M磷酸钾缓冲液pH 7.0将1 ml溶液进一步稀释至50 ml。每天准备新鲜。
0.0025 M 四、氨基安替比林和0.17 M苯酚：通过810 mg苯酚溶解在40 ml制备试剂级水。25 mg 4-氨基安替比林，用试剂级水稀释至最终体积50 ml。
酶：
以1 mg/ml溶解在试剂级水中。临时使用前，进一步稀释0.02-0.04ΔA/min的速率。
程序：
将分光光度计调整到510 nm和25°C。
将移液器移入每个比色皿中，如下所示：
苯酚/氨基安替比林溶液1.4毫升
0.0017 M过氧化氢1.5毫升
在分光光度计中25°C孵育3-4分钟达到温度平衡，确定空白率(如有)。0.1 ml并记录稀释酶A 510的增加4-5分钟。从曲线的线性部分计算ΔA 510 /分钟。
计算：
注：虽然苯酚安替比林法的反应速率低于以前的方法4.5-4.7倍，但是过氧化物酶制剂是一样的。
RZ (Reinheitzahl)是吸光比，A 403 /A 275 (RZ)已被用作纯度指示。然而，香农等人。(1966)报告称，同工酶的比率从2.50变化到4.19。这一点，连同缓冲液和pH该值的影响似乎质疑了该比率作为纯度标准的准确性。