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替代JC-1,MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒方案

线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)是一种以JC-1是一种快速、灵敏地检测细胞、组织或纯化线粒体膜电位变化的试剂盒,可用于检测线粒体的健康状况,也是检测细胞早期凋亡的常用方法。

JC-线粒体膜电位广泛用于检测△Ψm理想荧光探针。JC-1染料在线粒体中积累电势依赖性。在正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);由于膜电位下降或丧失,不健康的线粒体,JC-1只能以单体形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。因此,颜色的变化直接反映了线粒体膜电位的变化。也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量线粒体的去J化程度。

线粒体膜电势损伤是细胞凋亡早期的标志性事件。细胞凋亡诱导后粒体膜电位的变化改变了膜的渗透性。膜渗透性的增加使线粒体蛋白包括细胞色素C、Smac/DIABLO、HtrA2/OMI、核酸内切酶G(EndoG)、凋亡诱导因素(AIF)等从线粒体基质释放到细胞浆。细胞色素C的释放伴随膜电位的完全丧失,进而引发细胞凋亡酶的级联效应。

Enzo Life Sciences艾美捷MITO-ID系列线粒体膜电位检测试剂盒-用阳离子染料测量线粒体膜电位,根据膜电位状态发出绿色或橙色荧光。染料以绿色荧光单体的形式存在于能量细胞中(膜电位高),在线粒体以橙色荧光聚集体的形式聚集。但在线粒体膜电位受损的细胞(膜电位较低)中,染料主要存在于整个细胞质中,绿色荧光单体不再出现在线粒体中。

Enzo Life Sciences艾美捷MITO-ID 线粒体膜电位检测试剂盒的特点:

比JC-1荧光染料灵敏10倍,水溶性好;

耐光双发射染料;

无需漂洗/换液过程;

单独的MITO-lD可用于检测线粒体质量;

在较低的药物/剂量浓度下检测细胞毒性;

没有像JC-像配方这样的溶剂伪影。

Enzo Life Sciences艾美捷MITO-ID线粒体膜电位检测试剂盒的应用:

左图:HeLa使用细胞线粒体MITO-ID膜电位染料染色,并通过落射荧光显微镜观察。橙色荧光聚集体位于线粒体(橙色通道),绿色荧光单体主要染色细胞质(FITC通道)。

右图:对照组和处理组细胞的流式细胞术分析。Jurkat未经处理(左)的细胞使用1μM CCCP处理15分钟(右)MITO-ID膜电位染料染色细胞FACS Calibur操作仪器。

标签: 电位器强度高

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