焦磷酸盐(PPi)它是通过许多生化反应产生的,例如ATP水解、DNA和RNA腺苷酸环化酶聚合形成环状AMP以及脂肪酸的酶激活,形成其辅酶A酯。艾美捷PhosphoWroks? 焦磷酸盐磷酸盐提供了最可靠的分光光度法。
艾美捷荧光焦磷酸检测试剂盒采用专用荧光焦磷酸盐传感器,其荧光强度与焦磷酸盐浓度成正比。检测方法比酶偶焦磷酸盐更容易、更可靠,至少需要两种酶来检测焦磷酸盐。该试剂盒提供了测量焦磷酸盐的所有基本成分。该试剂盒已成功用于高通量筛选(HTS)。
荧光酶标仪,艾美捷荧光焦磷酸检测试剂盒:
励磁316纳米
排放456纳米
隔断420纳米
推荐板纯黑色
艾美捷荧光焦磷酸检测试剂盒组件:
组分A:检测缓冲液1瓶(25毫升)
组件B:PPi传感器1小瓶(冻干粉)
组分C:焦磷酸盐标准产品1瓶(1毫升,50毫米)
组分D:二甲基亚砜1瓶(200 μL)
制备标准溶液:
焦磷酸盐标准产品
将50μL的1 mM添加焦磷酸盐标准溶液450μL的ddH2O或50 mM Hepes缓冲液中,以获得100μM焦磷酸盐标准溶液(PS7)。取100μM焦磷酸盐标准溶液ddH2O或50 mM Hepes进行缓冲液1:3焦磷酸盐标准溶液连续稀释以获得连续稀释(PS6 - PS1)。
准备工作解决方案:
将25μL的200X PPi加入传感器原液5 mL检测缓冲液(成分)A)中间,充分混合制成PPi工作溶液。
注意因为检测对PPi高灵敏度,不含使用PPi实验室设备和试剂非常重要。DTT≥1 mM会增加背景,MgCl 2≥2 mM会降低响应。
艾美捷荧光焦磷酸检测试剂盒示例:
图:纯黑色荧光酶标仪96孔板中使用PhosphoWorks? 荧光焦磷酸盐检测试剂盒测量焦磷酸盐,ATP与磷酸盐剂量反应。